病请描述： 高血糖导致的血管损伤一般表现为血管内皮功能紊乱,造成血管硬化,血栓形成,进而导致血管管腔狭窄,甚至血管闭塞。如果供应某一器官的血管狭窄,这个器官就会缺血缺氧。根据狭窄的血管所供应的器官不同而出现不同的症状。 因此,患了糖尿病,全身各组织器官的工作均可能受累,其中主要累及心、脑、肾等重要生命器官。 01 糖尿病高血糖有几伤！ 伤“心” 供应心脏的冠状动脉狭窄可导致冠心病甚至心肌梗死。与冠心病有关的最基本检查是心电图,因此糖尿病患者应该至少每半年查一次心电图,以便早期发现冠心病。一旦合并冠心病,应积极治疗。 伤“脑” 供应大脑的血管狭窄可导致脑缺血甚至脑梗死。糖尿病患者脑血管病的发生率比非糖尿病患者要高得多,一旦糖尿病患者出现反复头痛眩晕、头部跳痛等症状,应及时到神经内科就诊,行相关检查,并及时采取相应的治疗措施。早期预防动脉粥样硬化,除降糖治疗外,还要保持血脂、血压正常,降低血液黏度,控制体重。 伤“肾” 当高血糖影响到肾脏的血管时,尿中白蛋白排泄会增加,并逐渐进展至大量白蛋白尿和血肌酐水平升高,最终发生肾衰,需透析或肾移植。糖尿病患者,应该定期复查尿白蛋白。在糖尿病肾病的早期阶段通过严格控制血糖、血压,防止或延缓糖尿病肾病的进展。 伤“眼” 糖尿病性视网膜病变是糖尿病性微血管病变中最重要的表现之一,糖尿病的病程越长,视网膜病变的发生率越高,在首诊的2型糖尿病患者中21%有视网膜病变,70%的2型糖尿病患者出现增殖性视网膜病变,致盲率极高。 糖尿病视网膜病变早期可以通过激光治疗,减少眼底出血。如果已到晚期,失去治疗时机,容易发展至失明。因此糖尿病患者应该每半年去眼科查一次眼底,以便及时发现眼底病变,及时治疗。 糖尿病导致的动脉硬化及微血管病变基础上产生的慢性并发症,已成为影响糖尿病预后的主要因素,因此糖尿病的早期诊断,合理控制血糖等一系列的努力,最终是为了延缓并发症的发生、发展,使患者延长生命,提高生活质量。 02 糖尿病血糖失控的12个信号！ 血糖失控代表什么？代表着糖尿病复发以及可能衍生出更多的糖尿病并发症，非常可怕。而又有多少人知道自己的血糖已经失控了呢？据不完全统计，至少有12个身体信号，能够说明血糖失控，而当事人还被蒙在鼓里。 1.视力变化。糖友有时可能会发生视力模糊，阅读困难，晚上看灯出现光环等现象。血糖过高容易造成视力模糊，看东西出现黑点或者闪光等问题。另外，从黑暗处到较亮处时，糖友眼睛需要更长时间加以调节。 2.听力丧失。耳朵中很多细小血管及神经对听力过程起到关键作用。高血糖会损伤这些血管和神经，使糖尿病患者听力丧失危险比普通人群高两倍。 3.牙龈出血。除了出血之外，高血糖还会导致牙龈萎缩及出现严重牙周病的症状。久拖不治，则容易导致牙齿脱落。牙龈炎会导致血糖更难控制，从而形成恶性循环。 4.口腔干燥或溃疡。高血糖会导致口干舌燥，更容易发生口腔疼痛、溃疡、炎症和龋齿。勤刷牙和每半年看一次牙医，有助于防止与糖尿病有关的口腔疾病。另外，戒烟和定期清洁假牙也非常重要。 5.头晕或头昏眼花。血糖过高容易造成起身站立速度太快时感到有昏晕感，心跳过快。这些情况可能会突然发生，或者同时伴有呼吸急促、胸闷、说话不清或视力丧失。这时心脏或大脑供血可能减少或受阻。应立即求助或拨打急救电话，及时就医。 6.四肢刺痛或麻木。神经损伤会扰乱四肢与大脑之间的神经传递信号。血糖过高容易造成手脚针刺感或麻木，走路时感到脚痛。腿部和脚部肌肉力量减弱，站立不稳。 7.手脚经常疼痛。受损神经会传递混乱的信号，造成身体反应与外界刺激难以同步。很轻柔的毛毯碰到脚都可能会产生疼痛感，夜间疼痛更明显。另外，糖友会感觉手脚极热或极冷，或者感觉像戴了手套和穿了袜子。 8.腿部痉挛或疼痛。血液循环不良会导致糖友走路或者进行其他身体活动时发生小腿、大腿或臀部疼痛。休息后，疼痛感减轻。建议将此症状告诉医生，可能需要采取相应的必要措施保护血管。 9.肠道及膀胱功能紊乱。高血糖损伤膀胱神经后，患者难以识别何时该小便，导致憋尿，从而让膀胱炎频发。如果肠道神经持续受损则容易导致便秘和腹泻。胃部消化食物能力也会大大削弱，导致呕吐和腹胀。 10.出汗异常。血糖过高容易导致一些患者出汗更频繁，夜间或吃饭时尤其严重。但是，有些患者则完全不出汗，即使在大热天也很少出汗。另外，检查一下脚底，如果皮肤很干燥，说明汗腺功能出现异常。 11.皮肤干燥或瘙痒。血糖过高时，体液相对较少，更容易导致皮肤干燥和瘙痒。皮肤裂口容易造成细菌侵入皮肤，导致感染愈合缓慢。其他症状包括：皮肤出现黑色斑点、水疱、皮疹、鳞状脱屑或豌豆大小的硬块。皮肤局部还会出现僵硬、蜡状、发凉或无毛等现象。12.性生活困难。性器官也会受到神经损伤的负面影响。血糖过高容易导致男性勃起困难或勃起时间过短，容易导致女性阴道干涩、性唤起困难、难以达到高潮。因此，出现性问题，也要查查血糖。 这12个可怕的身体信号完全能够说明的你的血糖出现了问题，一旦发现症状，应立即就医，而不是存有“过两天就好了”的侥幸心理，耽误了最佳治疗时间。 03 糖尿病高血糖怎么办？ 高血糖的危害不容忽视，对糖尿病患者来控制好血糖是最关键的。首先看看如何把高血糖降下来的方法？ 少吃多餐 去掉一次零食或改吃血糖生成指数（GI）较低的食物由于对于超重的2型糖尿病患者来说，只需让自己的体重减轻5～10%，就能够显着地改善血糖情况。所以，只要适当地减少热量摄入，就可以获得更好的血糖控制。 中餐“西”吃 在糖尿病的科学饮食疗法中，尝试一下中餐“西”吃，应该是一个不错的选择。 西餐中一些常用的烹调手法（如蒸、拌、煮），基本上很少用油，或者不用油。黄瓜、番茄、生菜、卷心菜、花菜、西兰花，是制作西餐时常用的蔬菜。这些蔬菜所含热量低，有利尿作用，能生吃的就尽量生吃，个别品种开水焯一下即可食用。这样可充分保留蔬菜的维生素和营养成分。 不过，西餐的烹饪方法中也有不适合病友的，如采用煎、炸、烤等方法制作的食品。西餐中还常用黄油（奶油）代替烹调用油，但黄油（奶油）中含有大量的饱和脂肪酸，对糖尿病合并心脑血管疾病的患者有危害。所以糖尿病患者在中餐“西”吃时应避免煎、炸、烤等烹调方式。 喝点茶 经常的喝茶能够帮助我们控糖，但是要注意不要喝太多的饮料，以免血糖增加，糖尿病患者为了防止血糖的身高，有很多饮品是碰不得的，比如含糖量多的碳酸饮料、果汁等。不过作为三大饮品之一的茶对于糖尿病患者来说可是利大于弊的。茶不仅能提供人体充足的水分，还含有多种营养成分，如蛋白质、茶多酚、生物碱、氨基酸、矿物质等，对防治糖尿病慢性并发症有重要作用，只要学会喝茶，不仅能够帮助降低血糖水平，还有预防并发症的功效哦。 做些有氧运动 适当的进行有氧运动能够帮助我们有效的降糖，因为适当的运动是可以帮助我们消耗血糖的，养成适度、恒定的运动习惯，对于血糖控制也同样重要！运动不仅可以促进能量的消耗、减轻体重；同时，也有助于降低中性脂肪及低密度胆固醇，提高高密度胆固醇。
俞一飞 2024-05-27阅读量4719
病请描述：尿微量蛋白检测的临床意义 尿微量蛋白是指正常尿液中含量极低的一组蛋白质，但在肾脏病变时，尿液中微量蛋白含量可异常升高。目前临床检测的尿微量蛋白包括尿微量白蛋白、β2微球蛋白、尿转铁蛋白、α1微球蛋白、免疫球蛋白G。 尿微量蛋白检测临床意义：1）用于诊断肾脏疾病，如儿童紫癜性肾炎或狼疮性肾炎蛋白尿定义之一是尿微量白蛋白>30mg/dl（1周3次），β2微球蛋白和α1微球蛋白增高可以用于Dent病诊断；2）用于早期发现其他疾病引起的肾脏损害，如糖尿病肾病、高血压肾病、紫癜性肾炎的早期监测；3）有助于鉴别肾脏损害位置，尿白蛋白、转铁蛋白和免疫球蛋白G增多提示肾小球损害，而β2微球蛋白和α1微球蛋白提示肾小管损害（见下图），这样有助于蛋白尿病因（肾小球疾病还是肾小管疾病）的鉴别；4）有助于评价肾脏疾病治疗效果，临床治疗相关肾脏疾病追求尿蛋白转阴，也同样追求微量蛋白正常，如紫癜性肾炎、狼疮性肾炎、糖尿病肾病等疾病理想治疗目标是尿微量蛋白正常。
李国民 2024-04-12阅读量3864
病请描述：标题：血糖波动与肥胖儿童的健康挑战——科普案例与解决方案 【引言】 在当今社会，儿童肥胖问题已经成为全球公共卫生关注的焦点，伴随着肥胖而来的是多种并发症，其中血糖异常是其中一种重要表现。高血糖不仅对肥胖儿童的短期健康构成威胁，还可能导致长期的心血管疾病、糖尿病等慢性疾病的发生。本文通过一个真实的科普案例，深入剖析血糖异常如何影响肥胖儿童的健康，并探讨有效的预防与干预措施。 【科普案例：小强的成长经历】 小强今年11岁，体重远超同龄孩子的平均水平，BMI指数达到35，被诊断为重度肥胖。在一次学校体检中，小强的空腹血糖检测结果显示高于正常范围，进一步的糖耐量试验结果显示，小强已经出现了糖耐量受损，这是糖尿病前期的一个重要标志。 【肥胖与血糖异常的关联】 小强的案例揭示了一个常见的现象，即肥胖儿童易出现胰岛素抵抗。过多的脂肪组织，尤其是腹部脂肪，会分泌一些能干扰胰岛素正常工作的物质，导致体内胰岛素作用效率降低，即胰岛素抵抗。为了对抗这种抵抗，胰岛β细胞不得不分泌更多的胰岛素来保持血糖稳定，久而久之，胰岛β细胞可能会疲劳乃至功能衰退，进一步加剧血糖的不稳定。 此外，肥胖儿童往往伴有不良的饮食习惯，如高糖、高脂肪饮食，这些食物在短时间内会快速升高血糖水平，使胰岛素分泌压力增大，加重胰岛素抵抗的状态。随着时间推移，若不加以干预，胰岛素抵抗逐渐恶化，很可能发展为2型糖尿病。 【健康危机与并发症】 高血糖对小强的影响不仅仅局限于短期内的疲劳、多饮、多尿等不适感，更长远来看，持续的高血糖状态会损害血管内皮细胞，增加动脉粥样硬化的风险，从而导致心脑血管疾病年轻化。此外，高血糖还可能损伤眼睛、肾脏和神经等多个器官，引发糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病和糖尿病周围神经病变等并发症。 【治疗与干预措施】 针对小强的情况，医生给出了全方位的干预方案。首先，调整饮食结构，倡导低糖、低脂、高蛋白、高纤维的健康饮食，控制每日总热量摄入，减少血糖波动。其次，强化体育锻炼，增加有氧运动和力量训练，以提高胰岛素敏感性，改善血糖控制。同时，家长和医生共同监督小强的生活习惯，确保规律作息，减少熬夜和不健康的零食摄入。 经过半年以上的努力，小强的体重明显下降，血糖水平回归正常，糖耐量试验结果也有所改善。这一实例说明，对肥胖儿童的血糖异常问题，通过早期发现、早期干预，完全有可能逆转不良发展趋势，保护他们的身心健康。 【结语与启示】 血糖异常在肥胖儿童群体中的普遍性提醒我们，家长、学校和社会各方均应重视儿童肥胖问题，积极开展健康教育，推广科学的饮食与运动习惯。对于已经出现血糖异常的肥胖儿童，应尽快寻求专业医疗团队的帮助，制定个性化的治疗方案，通过生活方式调整和必要的药物治疗，以期有效控制血糖，降低未来发生糖尿病及相关并发症的风险。通过全社会的共同努力，我们有望为肥胖儿童创造一个更加健康、活力充沛的成长环境。
生长发育 2024-04-07阅读量3328
病请描述：糖尿病慢性并发症是医生们较为关注的疾病，尤其是春节过后，并发症的发病率比平日更高。糖尿病患者应当及时进行复查，以确保身体健康状况的稳定。 糖尿病可怕的是并发症，主要分为急性并发症和慢性并发症。 急性并发症包括糖尿病酮症酸中毒、高血糖高渗状态、乳酸性酸中毒等，治疗原则主要是纠正病理生理缺陷，补充液体和电解质，控制血糖，抗感染以及纠正电解质紊乱。如果出现黑朦、晕厥等症状，应立即就医，防止发生不可逆的影响。 慢性并发症则常见于大血管、微血管受损，并可能危及心、脑、肾、周围神经、眼睛、足等部位。慢性并发症的治疗总体原则是以控制血糖、控制血压、调节血脂、饮食治疗、纠正脂代谢紊乱为主。具体来说，糖尿病可能导致以下几种慢性并发症： 心血管疾病：糖尿病的人容易出现心血管类疾病，这种并发症会直接威胁到生命，特别是女性糖尿病患者。 感觉神经过敏：这也是糖尿病的并发症之一，可能包含麻木、感觉过敏、疼痛等症状。 糖尿病足：这是由糖尿病血管病变或疾病感染引起的，如果控制不及时，轻者可能截肢，重者可能直接威胁到生命。 白内障：糖尿病会影响眼睛，有些人可能会出现白内障，导致视力模糊，长时间未得到控制还可能导致失明。 脑血栓：糖尿病患者的血液中糖含量较高，使得血液粘稠度增加，血流速度减慢，容易引发脑血栓。 此外，糖尿病并发症还可能表现为多饮、多尿、多食、疲劳、体重下降、视力模糊、感染易发等症状。 为了预防糖尿病并发症，建议采取以下措施： 运动：适当运动可以预防发胖，因为肥胖是糖尿病并发症的重要因素之一。运动有助于控制血糖，促进血液循环，提高脏器代谢功能。 饮食：控制饮食是控制血糖的关键。应避免食用会导致血糖升高的食物，如肥肉、油炸食品、甜食和高淀粉食物。应保持饮食清淡，多吃蔬菜，并选择低糖水果。 药物使用：正确使用降糖药物非常重要。过量使用降糖药物可能导致免疫系统功能受损，引发严重的并发症。 请注意，以上仅为糖尿病并发症的一般情况，具体的并发症和症状可能因个体差异而有所不同。因此，糖尿病患者应定期接受医疗检查，并在医生的指导下进行治疗和管理。 那么具体都需要完善哪些检查呢？ 01血糖水平 可以通过自我血糖监测和动态血糖监测评估血糖波动程度。日常的血糖监测可以评估餐前、餐后高血糖及生活事件和降糖药物对血糖的影响，同时可以预防低血糖的发生。 02糖化血红蛋白 可以间接反映患者近三个月的平均血糖水平，可作为预测慢性并发症的一个重要指标。如果大于7%，发生慢性并发症的风险显著增高，需多注意饮食和运动，及时寻求医生帮助，指导调整治疗方案，必要时可能需要住院排查。 03血脂系列 糖尿病患者常伴发脂代谢紊乱，以高甘油三酯和低高密度脂蛋白胆固醇为主，这与胰岛素抵抗密切相关。及早发现糖脂代谢紊乱并早期干预，可以有效防治动脉粥样硬化，减少心脑血管疾病发病率。 04肝肾功能 可以评估糖尿病对肝肾功能是否造成损伤，明确肝肾功能受损的原因，判断预后以及药物疗效，观察药物不良反应等作用。 05尿常规 需要关注尿糖、尿酮体、尿蛋白、尿微量白蛋白等指标。尿糖阳性往往提示血糖过高或肾脏受损。尿酮体阳性合并尿糖阳性、高血糖时提示糖尿病酮症可能性大，应尽快进一步检查和治疗。尿蛋白阳性提示肾脏受损，若合并尿中白细胞多，则尿路感染可能性大。尿微量白蛋白可用于筛查早期糖尿病肾病。 06心电图、超声心动图、冠状动脉CT及造影 糖尿病是心血管疾病的独立危险因素，糖尿病患者发生心血管疾病的风险是非糖尿病患者的2-4倍。更为，糖尿病一旦合并神经病变，会对疼痛不敏感，难以察觉身体的不适，可能会失去最佳救治时机。所以糖尿病患者一定要定期做心脏相关检查，有“糖心共治”的意识。 07颈动脉超声、下肢动脉血管超声 早期发现和预防动脉粥样硬化，是预防糖尿病大血管并发症的关键。血管超声方便、简单、无创，可以清晰显示血管内中膜是否增厚，有无斑块形成，是否存在血管狭窄及狭窄程度，有无闭塞等详细情况，是预测心脑血管事件及糖尿病足等疾病发生的必要检查。
微医健康 2024-04-01阅读量6380
病请描述：尿液检查是临床或体检很常见的一项检查， 尿常规检查中有一个项目是上皮细胞， 今天来聊聊尿液中的上皮细胞来自哪里？ 有什么临床意义。 标准名称：尿沉渣上皮细胞测定 英文名称：Urinary epithelial cell 尿液中上皮细胞 来自肾小囊、肾小管、肾盂、输尿管、膀胱、尿道及尿道外口甚至前列腺等处。 女性还有可能是外阴脱落细胞污染在尿液中。 不同部位的上皮细胞各具形态特点。 肾小管为立方上皮； 肾盂、输尿管、膀胱等处均覆盖移行上皮细胞； 尿道为假复层柱状上皮细胞，近尿道外处为复扁平上皮细胞； 男性尿中偶尔见到前列腺细胞。 在这些部位有病变时，尿中也会出现相应的上皮细胞增多。 ①肾小囊脏层上皮细胞（足细胞） 据报道检测尿足细胞可作为肾病综合征病因（MCD微小病变肾炎或FSGS局灶节段性硬化肾炎）的鉴别指标，评估糖尿病肾病进展程度的指标和监测肾小球病变的活动性、先兆子痫的辅助诊断指标等。 ②肾小管上皮细胞 正常尿很少见到，大量肾小管上皮细胞见于急性肾小管坏死、肾小管间质炎症，此外肾病综合征、大量蛋白尿、肾移植一周内或肾移植排异反应，均可见较多肾小管上皮细胞。 ③移行上皮细胞 增多见于泌尿系炎症。 ④鳞状上皮细胞 也称扁平上皮细胞，来自尿道或阴道表层上皮，正常尿液中有少量，炎症或恢复期增多，女性若有大量鳞状上皮细胞，伴成堆中性粒细胞，可能是白带污染，应冲洗外阴后再留。 ⑤多形核巨细胞 见于病毒感染，如麻疹、水痘、腮腺炎等。 ⑥诱饵细胞 肾病患者肾移植后接受有限免疫抑制治疗易发生多瘤病毒相关性肾病或间质性肾炎，一旦发生可能导致移植肾失去功能。 ⑦肿瘤细胞 尿脱落细胞学，为泌尿系肿瘤诊断提供依据。
冯爱桥 2024-03-26阅读量3974
病请描述：近年来，随着生活水平的提高和消费结构的变化，人们所面临的病症也日趋复杂，如糖尿病患者并发心律失常的综合病症。这类病症给医疗事业带来了巨大挑战，本文对糖尿病患者发生心律失常病症的基本了解包括其病理、症状、易发人群及治疗和护理过程中需特别注意的问题进行了研究。 研究结果表明：糖尿病主要由胰岛素含量失衡或功能障碍引起，而心律失常则可能由多种因素导致。对于这类综合病症，我们需要形成一套完整的预防、治疗和护理体系。在护理方面，科学有效的护理策略对于改善患者的生活质量和治疗效果至关重要。护理人员应熟练掌握基本操作技术，对药物护理等事项有明确认识，并在患者病情发生变化时及时采取措施。此外，针对不同类型的糖尿病并发心律失常病症，我们需要制定特定的护理方案，以确保患者得到最佳护理效果。 当前环境下需要不断提高医疗水平，为患者提供更加科学、有效的治疗和护理服务。 参考文献： [1]祁桂芬. 糖尿病患者发生心率失常类型及护理分析[J]. 糖尿病新世界, 2015, (08): 216.
微医药 2024-03-26阅读量4212
病请描述：糖尿病肾病是糖尿病患者常见的并发症之一，其患病率逐年上升，给患者健康带来严重威胁。该病症在不同阶段表现不同，早期症状不明显，但及时诊断和治疗至关重要，因为一旦进入中晚期，肾功能将受到严重损害，难以恢复。 研究结果表明：西医治疗方法中，内质网应激被认为是糖尿病肾病发病的重要机制之一，调控内质网应激偶联的炎症信号通路可能成为有效的治疗方法。此外，血液透析等技术也广泛应用于临床治疗，能有效清除体内毒素和炎症因子，保护血管和免疫功能。但长期使用血液透析可能引发糖代谢紊乱等不良效果，因此需要适当控制透析频率。 中医治疗糖尿病肾病则注重益气养阴、活血化瘀散结以及清热利湿活血等方法。中医认为肾虚血瘀是糖尿病肾病产生的根本原因，因此治疗多以改善肾虚和血瘀为主。近年来，“肾络微型癥积”学说逐渐成为糖尿病肾病理论研究的基础和治疗的新方向。 总之，糖尿病肾病的治疗需要综合考虑患者病情、治疗方法的优缺点以及患者的实际情况。中西医结合治疗糖尿病肾病是一种值得推广的有效方法，可以为患者提供更好的治疗效果和生活质量。 参考文献： [1]李锦玉, 刘孝猛, 李波, 李萌. 糖尿病肾病的病症及治疗方法进展研究[J]. 糖尿病新世界, 2015, (20): 70-72.
微医药 2024-03-26阅读量2474
病请描述：糖尿病性心肌病以心肌肥大和纤维化为特征，与高血压、冠状动脉疾病或其他特发性心脏病无关。糖尿病性心肌病的发病机制尚不清楚。先前的研究已经强调了代谢紊乱(萄糖转运体功能障碍、游离脂肪酸增加、钙稳态异常改变、铜代谢紊乱、胰岛素抵抗)、心肌纤维化(与高血糖、心肌细胞凋亡、血管紧张素11、IGF-1和促炎细胞因子升高基质金属蛋白酶活性改变等相关)、心脏自主神经病变的重要性。干细胞在糖尿病性心肌病演变中的作用。本文就尿病性心肌病发病机制的最新进展作一综述，以期有助于明确糖尿病相关心脏病的病理。 研究背景和问题：此研究背景主要是两个维度：糖尿病肾病作为一种严重的糖尿病并发症，以及Metallothionein作为一种具有抗氧化和抗炎特性的蛋白质。研究问题是探究Metallothionein缺乏是否会恶化糖尿病肾病。由于糖尿病肾病的治疗仍面临着很多挑战，理解其病理机制是至关重要的。 研究方法和实验设计：此研究主要运用了链脲佐菌素诱导小鼠糖尿病模型，并通过基因技术制造出Metallothionein缺乏的小鼠，以观察肾脏的病变情况。这种设计是一种常见且有效的手段，能在一定程度上模拟人体的情况。 研究结果和结论：结果显示，Metallothionein缺乏会恶化链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠的肾病变。这一结论回答了研究问题，而且具有一定重要性，我们可以从中知道Metallothionein具有保护肾脏，防止糖尿病肾病的可能机制。 结果的限制：然而，由于研究是在小鼠模型上进行的，可能无法完全模拟人类的生理状况，因此其结果的可推广性受到一定限制。另一方面，也仅仅揭示了Metallothionein缺乏的影响，并没有从机制层面深入。 研究意义和应用价值：尽管有其局限性，研究仍对了解和治疗糖尿病肾病提供了新的视角，可能有助于为疾病的预防和治疗提供新的研究方向和治疗靶点，这就是它的科研意义和应用价值。
微医药 2024-03-26阅读量2486
病请描述：糖尿病性肌坏死，也称为糖尿病性肌梗死，是一种罕见的糖尿病并发症，通常与长期血糖控制不佳有关。虽然已经提出了动脉粥样硬化、糖尿病微血管病变、血管炎、缺血再灌注损伤和高凝状态等理论来解释病理生理，但这些理论都不能单独解释整个病理生理。糖尿病肾病是DMN发生及复发的最常见危险因素。由于缺乏认识和表现模仿与糖尿病相关的其他条件，经常错过诊断。常规实验室检查通常是非特异性的，也不能提供太多的诊断价值。肌肉活检可以提供明确的诊断，但目前不推荐，因为它的侵入性和与症状消退时间较长有关。磁共振成像，结合经典病史和危险因素可以确定诊断。治疗通常是镇痛和休息，尽管前者的使用可能在存在肾脏疾病时受到限制。 学习点: ·糖尿病性肌坏死是一种罕见的糖尿病并发症，与长期血糖控制不佳相关。·糖尿病肾病是一个已知的危险因素，尽管证据仅仅是观察性的。·虽然肌肉活检可以提供明确的诊断，但不推荐使用，因为它会延长疾病的进程，只应用于对常规治疗无效的病例。·目前的治疗建议包括非甾体抗炎药和/或阿司匹林(如果没有禁忌症)，同时卧床休息。不建议在急性期进行物理治疗，但应在患者出院后立即开始。最佳血糖控制是预防复发的关键。 背景 糖尿病性肌坏死(DMN)，也称为糖尿病性肌梗死，是糖尿病(DM)的一种罕见并发症，伴有血糖控制不佳(1)。由于缺乏认识和表现与DM相关的其他疾病相似，经常错过诊断。常规实验室检查通常是非特异性的，对诊断没有太大价值(2)。我们提出一个长期糖尿病控制欠佳的年轻人，表现为大腿疼痛、肿胀和活动能力降低。案例展示 一名35岁的南亚男性因右大腿疼痛、肿胀和活动能力降低3天入院。他没有任何其他相关症状，并否认有任何创伤史。过去也没有类似症状的病史。由于长期治疗依从性差，诊断为1型糖尿病，血糖控制欠佳。结果，他患上了双侧糖尿病黄斑病变和终末期肾病，他最近开始进行腹膜透析。在陈述时，由于糖尿病继发的长期疾病，他处于失业状态。他不抽烟，也不喝酒。经检查，他发热，其他方面血流动力学不显著。他右大腿前内侧的上三分之一有压痛。在压痛部位没有红斑或任何其他炎症迹象。其余临床检查无显著差异。调查初步调查显示贫血(92g/L;参考范围(RR): 133-166g/ L)，中性粒细胞(8。3x10 9/I;RR: 1。6-4。6x109 /L)，c反应蛋白(CRP)升高(208 mg/L;RR:0~5 mg/L)，肌酸激酶轻度升高(392U/L;Rr:30-200u/ l)。胸部x光和尿液分析均未见感染迹象。d-二聚体升高(1145 ng/mL;RR: 0 ~243 ng/mL)，行超声多普勒排除深静脉血栓形成。相反，扫描显示右侧大收肌广泛弥漫性皮下水肿。肌炎与迟发性肌肉酸痛的鉴别诊断被提出，并推荐磁共振成像(MRI)。对新插入的腹膜透析导管进行疝气造影，显示腹膜透析导管的尖端投射到骶骨上，没有泄漏的迹象。 治疗 患者最初接受静脉注射抗生素和支持性药物治疗，怀疑是蜂窝织炎。右大腿MRI显示明显的肌肉水肿，部分区域破裂提示感染性肌炎(图1)。尽管进行了3周的药物治疗，患者仍然感到疼痛，临床状况变化很小。鉴于怀疑自身免疫引起的肌炎，风湿病学家进行了广泛的自身免疫筛查，所有结果均显示正常。因此，考虑到4周药物治疗效果不佳，我们寻求骨科医生的意见。右大腿肌肉活检显示坏死性肌炎的特征(图2)。入院5周后，患者转至糖尿病组检查其血糖控制欠佳，延迟了其恢复。根据经典病史和影像学表现，患者被诊断为DMN。患者给予常规镇痛、卧床休息和良好的血糖控制。 结果和随访患者出院，建议继续卧床休息和镇痛。4周后，他来到我们的门诊，当时他已经没有疼痛了，正在等待物理治疗，以恢复患腿的体力。 讨论 DMN是糖尿病(DM)中一种与血糖控制不佳相关的罕见并发症(1)。它主要见于1型DM患者，但也可发生在2型DM患者中，在文献报道中以女性为主(3)。尽管已经提出了动脉粥样硬化、糖尿病微血管病变、血管炎、缺血再灌注损伤和低抗凝血酶-iii水平继发的高凝状态等理论来解释其病理生理，没有一个是完全令人信服的(4)。我们的病例强调了可能影响我们病例结果的两个主要因素的重要性:医疗专业人员缺乏对 DMN的认识，突出的是延迟诊断和部分信息对成像请求的影响。在超声多普勒和MRI的两个例子中，放射科医生都没有提供患者的糖尿病病史，这可能已经排除了DMN作为图像发现的差异。该病例还重申了早期多学科方法对早期诊断和治疗的重要性。DMN的常见鉴别诊断为创伤、深静脉血栓形成、血肿、脓肿、筋膜炎、炎性肌病、与结缔组织疾病相关的肌炎、感染性肌炎(包括化脓性肌炎和病毒性肌炎)、浸润性肿瘤、横纹肌溶解、血管原因(Behcet病、镰状细胞危象)和迟发性肌肉酸痛(DOMS)(5)。所有这些都可以通过详细的病史和集中的血液和放射检查来排除。另一种罕见的鉴别诊断是自身抗体阴性免疫介导的坏死性肌病。这种知之甚少的情况往往影响年轻人，导致近端肌肉严重无力。然而，这些病变有肌纤维坏死，肌肉活检显示有少量炎症细胞浸润，因此与DMN有区别(6)。下肢是最常受影响的肌肉群(87)。8%)，下肢近端(膝盖以上)占58%。占所有DMN病例的5%(7)。最常见的临床表现是突发性疼痛，局部肿胀和发烧。由于缺乏认识和这些非特异性症状，经常在首次出现时错过诊断。常规检查如白细胞计数、CK、CRP、 ESR和x线检查通常对DMN无特异性(2)。MRI是目前首选的检查方法，尽管其结果并不具有特征性。MRI的常见特征包括t2加权图像上的高信号和t1加权图像上的等或低信号，并伴有筋膜周围、肌肉周围和/或皮下水肿。超声也被推荐发现包括边缘良好，低回声的肌肉内病变。这些超声表现可与肿瘤或坏死性脓肿区分，且没有内部运动或液体在换能器压力下旋转， DMN中缺乏主要的消声区(2)。肌肉活检可提供明确的诊断，但由于其侵袭性，目前不推荐。此外，活检与DMN症状缓解所需时间延长有关(8)。在表现早期进行活检，可显示坏死和水肿区域，晚期发现包括纤维化组织和肌肉纤维再生伴淋巴细胞浸润。目前，活检仅用于对常规治疗无效的病例。非甾体抗炎药(NSAIDs)和/或阿司匹林伴卧床休息和镇痛是目前推荐的治疗DMN的方法。在一项研究中，与镇痛和卧床休息(支持性治疗)相比，非甾体抗炎药和阿司匹林联合使用可将恢复时间从57天提高到39天(9)。然而，需要注意的是，DMN患者可能同时患有肾脏疾病，这可能会限制非甾体抗炎药的使用。鉴于他的终末期肾病，我们只能对他进行支持性治疗;这可能导致恢复时间比平时长。DMN急性期的物理治疗一直存在争议，一项研究将物理治疗与DMN的恢复时间延长联系起来。然而，没有其他研究发现这种关联。目前的建议是在症状消退后提供物理治疗以改善活动能力(9,10)。在这些患者中使用预防性抗凝剂的证据有限。其他治疗策略，如糖皮质激素、抗生素和促红细胞生成素，过去也曾尝试过，但效果有限。DMN患者，尤其是肾病患者，是疾病复发的高危人群(7)。优化血糖控制被认为是预防DMN复发的关键。康复后的物理治疗也被证明可以降低风险(9)。有趣的是，接受肾移植的患者没有复发的报道，进一步加强了糖尿病肾病和DMN之间的联系(7)。需要进一步的研究来研究这种联系。病人的角度 患者住院5周后，当PK第一次见到他时，患者感到沮丧，正处于脱离医疗护理的边缘。病人对持续的疼痛和不确定的诊断感到沮丧是可以理解的。在对诊断及其病理生理学进行了详细的讨论和解释后，患者与糖尿病小组一起工作，并改善了他的血糖控制，这可能有助于他的康复。他心情很好，感谢我们在糖尿病门诊的随访。在此事件发生后，他已同意与医疗保健系统进行更好的接触，以防止再次发生。 1 Angervall L & Stener B. Tumoriform focal muscular degeneration in two diabetic patients. Diabetologia 1965 1 39–42. (https://doi. org/10.1007/BF01338714) 2 Trujillo-Santos AJ. Diabetic muscle infarction: an underdiagnosed complication of long-standing diabetes. Diabetes Care 2003 26 211–215. (https://doi.org/10.2337/diacare.26.1.211) 3 Choudhury BK, Saikia UK, Sarma D, Saikia M, Choudhury SD & Bhuyan D. Diabetic myonecrosis: an underreported complication of diabetes mellitus. Indian Journal of Endocrinology & Metabolism 2011 15 S58–S61. (https://doi.org/10.4103/2230-8210.83052) 4 Habib GS, Nashashibi M, Saliba W & Haj S. Diabetic muscular infarction: emphasis on pathogenesis. Clinical Rheumatology 2003 22 450–451. (https://doi.org/10.1007/s10067-003-0789-z) 5 Bhasin R & Ghobrial I. Diabetic myonecrosis: a diagnostic challenge in patients with long-standing diabetes. Journal of Community Hospital Internal Medicine Perspectives 2013 3. (https://doi. org/10.3402/jchimp.v3i1.20494) 6 Pinal-Fernandez I, Casal-Dominguez M & Mammen AL. Immunemediated necrotizing myopathy. Current Rheumatology Reports 2018 20 21. (https://doi.org/10.1007/s11926-018-0732-6) 7 Yong TY & Khow KSF. Diabetic muscle infarction in end-stage renal disease: a scoping review on epidemiology, diagnosis and treatment. World Journal of Nephrology 2018 7 58–64. (https://doi.org/10.5527/ wjn.v7.i2.58) 8 Gupta S, Goyal P, Sharma P, Soin P & Kochar PS. Recurrent diabetic myonecrosis -an under-diagnosed cause of acute painful swollen limb in long standing diabetics. Annals of Medicine & Surgery 2018 35 141–145. (https://doi.org/10.1016/j.amsu.2018.09.003) 9 Horton WB, Taylor JS, Ragland TJ & Subauste AR. Diabetic muscle infarction: a systematic review. BMJ Open Diabetes Research & Care 2015 3 e000082. (https://doi.org/10.1136/ bmjdrc-2015-000082) 10 Morcuende JA, Dobbs MB, Crawford H & Buckwalter JA. Diabetic muscle infarction. Iowa Orthopaedic Journal 2000 20 65–74
微医药 2024-03-22阅读量6236
病请描述：氧化应激和炎症在糖尿病并发症，包括糖尿病肾病中起重要作用。金属硫蛋白(MT)在糖尿病肾近端小管上皮细胞中作为抗氧化剂被诱导;然而，MT在肾功能中的作用尚不清楚。因此，我们研究MT缺乏是否通过氧化应激和炎症加速糖尿病肾病。注射链脲佐菌素诱导MT-t缺失小鼠(MT X/X)和MT-t/MT-t小鼠发生糖尿病。测量尿白蛋白排泄、组织学变化、活性氧(ROS)标志物和肾脏炎症。小鼠近端小管上皮细胞(mProx24)被用来进一步阐明MT在高糖条件下的作用。与糖尿病MT相比，糖尿病MT X/X小鼠的糖尿病肾病参数、ROS和炎症标志物加速，尽管血糖水平相当。MT缺乏加速了糖尿病肾间质纤维化和巨噬细胞向间质浸润。电镜显示糖尿病MTX/X小鼠近端小管上皮细胞线粒体形态异常。体外研究表明，在高糖条件下培养的mProx24细胞中，小干扰RNA敲低MT可增强线粒体ROS的产生和炎症相关基因的表达。本研究结果表明，MT可能在糖尿病肾病中保护肾脏免受高糖诱导的ROS和随后的炎症作用中发挥关键作用。糖尿病肾病;炎症;金属硫蛋白;氧化应激;糖尿病肾病是终末期肾脏疾病的主要原因，也是心血管疾病的独立危险因素(10,25)。糖尿病肾病的发生和发展有多种机制，包括遗传和血流动力学因素、氧化应激、大量研究表明，高血糖与活性氧(ROS)的生成增强有关，氧化应激与糖尿病肾病的发生有关(6,7)。新出现的证据也表明，炎症途径在糖尿病肾病的发病机制中起着至关重要的作用(20,26)。因此，氧化应激和炎症的调节可能是糖尿病肾病的主要治疗靶点。金属硫蛋白(MT)是一种细胞内金属结合蛋白，其特点是低分子质量(6-7kda)，高半胱氨酸含量(61-62个氨基酸中的20个)，没有芳香或组氨酸残基(30)。虽然已经鉴定了四种同种异构体，但MT-1和-2(MT-1/-2)作为主要同种异构体广泛分布于全身(30)。MT在重金属解毒和必需金属稳态中起重要作用(24)。此外，MT具有强大的抗氧化功能，是一种保护细胞和组织免受氧化应激的适应性蛋白(2,9)。先前的研究报道了MT对帕金森病小鼠模型的神经保护作用(5,17,18)。我们最近证实MT主要在肾近端小管上皮细胞中表达，高糖诱导的氧化应激可增强糖尿病肾脏中MT的表达(21)。这些结果表明，MT通过代偿上调来保护肾脏免受糖尿病引起的氧化应激的影响;然而，MT在糖尿病肾病发病机制中的作用仍然知之甚少。因此，本研究旨在研究MT在糖尿病条件下保护肾脏免受高糖诱导的氧化应激的作用，使用MT缺乏(MT X/X)和MT/X小鼠。我们还使用正常或高糖条件下培养的小鼠近端小管上皮(mProx24)细胞来确定小干扰RNA(siRNA)敲低MT是否会诱导线粒体ROS，从而导致炎症。 材料和方法 实验性的协议。雄性纯合子MT-1/2敲除小鼠(MT实验性的协议。雄性纯合子MT-1/2敲除小鼠(MT X/X)来自Jackson Laboratory(Bar Harbor,ME)。 MT X/X小鼠在129/Sv遗传背景下饲养，因此129/ Sv小鼠被用作野生型对照(MT/Sv)。所有程序均按照冈山大学医学院动物实验指南、日本政府动物保护和管理法(第105号)和日本政府动物饲养和安全通报(第6号)进行。8周大的小鼠分为四组:1)非糖尿病 MT/MT小鼠(ND-WT;N (7);2)链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病MT (DM-WT);N (7);3)非糖尿病MTX/X小鼠(ND-KO;N (7);4)糖尿病MTX/X小鼠(DM-KO;n<e:1>7).糖尿病被诱导并证实如先前报道(15)。所有的老鼠都可以免费获得标准的饮食和自来水。小鼠在诱导糖尿病后12周被安乐死。取下肾脏，称重，用10%福尔马林固定，进行周期性酸-甲基苯丙胺银(PAM)和马松三色染色。剩余组织的部分被嵌入最佳切割温度化合物(Sakura Finetechnical，东京，日本)，并立即在丙酮中冷冻，在干冰上冷却。其他组织在液氮中快速冷冻，并在X80°C下保存。为探讨STZ对糖尿病肾病的影响，将8周龄MT X/X小鼠分为3组:1)非糖尿病小鼠(ND-K0;N (5);2) stz诱导糖尿病小鼠(DM-K0;N (5);3)甘精胰岛素治疗stz诱导的糖尿病小鼠(DM-KO2glargine;n5).使用甘精胰岛素(Sanofi, Tokyo,Japan)。5:0。腹腔注射8u/体。小鼠在诱导糖尿病后12周被安乐死。取出肾脏，用10%福尔马林固定，进行PAM染色。代谢数据。12周时测量体重、肾脏重量、糖化血红蛋白、血清肌酐和24小时尿白蛋白排泄(UAE)。糖化血红蛋白用高压液相色谱法测定，血清肌酐用酶法测定。收集尿液24h，将每只小鼠单独置于代谢笼中，随意提供食物和水。阿联酋的测量方法如前所述(22)。光学显微镜。切片经PAM和马松三色染色分析。在糖尿病诱导后12周，通过高倍镜检查每只动物皮质中随机选择的10个肾小球(x400)来估计肾小球的大小。使用Lumina Vision软件(Mitani, Tokyo, Japan)测量肾小球簇和间质纤维化的面积。系膜基质指数(mesangial matrix index, MMI)定义为簇毛面积中pam阳性面积，计算公式为:MMI<e:1>(pam阳性面积)/(簇毛面积)。结果表示为平均值↑SE(每m2丛面积;MMI的任意单位)。 lmmunoperoxidase染色。免疫过氧化物酶染色如前所述(22)。简单地说，用低温恒温器切割4米厚的新鲜冷冻切片。使用大鼠抗小鼠单核细胞/巨噬细胞(F4/80)单克隆抗体(Abcam,Cambridge,UK)评估巨噬细胞浸润，然后使用生物素标记的山羊抗大鼠 lgG抗体(Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove,PA)。使用Vectastain Elite试剂盒(Vector Laboratories, Burlingame, CA)对切片进行亲和素-生物素偶联反应。计数每只动物10个肾小球中f4/80阳性细胞数。每个肾小球和间质组织的平均阳性细胞数(每mm2的数量)用于估计。Immunofluorescent染色。免疫荧光染色如前所述(21)。采用兔抗mt抗体(Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA)和Alexa Fluor 488驴抗兔IgG(Invitrogen, Carlsbad, CA)检测 MT-1/ 2在肾脏中的表达。为了确定MT-1/2是否定位于近端或远端小管上皮细胞，分别用山羊抗水通道蛋白-1(AQP1)抗体(Santa Cruz Biotechnology)或山羊抗tam - horsfall蛋白(THP)抗体(Santa CruzBiotechnology)反染色，然后用Alexa Fluor 594驴抗山羊lgG (Invitrogen)反染色。对于其他免疫荧光染色，抗IV型胶原(Millipore,Temecula, CA)，抗纤维连接蛋白(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO)和抗4-羟基烯醛(4-HNE;Abcam)被使用。荧光显微镜(BX51;奥林巴斯，东京，日本)。Western blot分析。如前所述进行 Western blotting(15)。简单地说，蛋白质被洗脱，用SDS-PAGE分离，并转移到硝化纤维素膜上。在20 mM Tris·HCl (pH 7)中阻断后。6)含150mm NaCl,0。1% Tween 20和5%(wt/vol)脱脂牛奶，用抗纤维连接蛋白(Sigma-Aldrich)和抗磷酸化nf-b-p65 (Cell Signaling Technology, Danvers, MA)孵育膜。将膜与anti-actin(Abcam)杂交以监测不同车道的等效负载。所有实验至少重复三次。电子显微镜。电镜下的组织准备如前所述(22)。近端小管上皮细胞在x1,500和x4,000显微镜下拍照。肾皮质基因表达的定量分析。治疗12周后，使用RNeasy Mini试剂盒(Qiagen, Valencia, CA)从肾皮质中分离RNA。F107 金属硫蛋白缺乏会加重糖尿病肾病(日本，东京)和FastStart SYBR Premix Ex Taq ll(日本，大津， Takara Bio)。引物是从塔卡拉生物公司买的。以 GAPDH为不变对照基因，采用比较Ct法对qRT-PCR结果进行评价。线粒体ROS检测。使用MitoTracker Red CM-H 2XRos(分子探针，Eugene,OR)和MitoTracker Green FM(分子探针)检测线粒体ROS。简单地说，将肾切片与10 M MitoTracker Red CM-H2XRos和MitoTracker Green FM在室温下孵育1小时。然后去除未结合的染料，使用荧光显微镜(BX51;奥林巴斯，东京，日本)。细胞培养和处理。小鼠近端小管上皮(mProx24)细胞由Takeshi Sugaya博士(CMIC)慷慨提供，并按照先前报道进行培养(21)。 mProx24细胞在添加5。5mMd-葡萄糖(低糖)，10%胎牛血清，100 U/ml青霉素，100 mg/ml链霉素，2mMI-谷氨酰胺。siRNA实验采用MT siRNA(sc-35926;Santa Cruz Biotechnology)和打乱的siRNA(sc-37007;圣克鲁斯生物技术公司)。mProx24细胞转染12。5nM MT siRNA或在Lipofectamine RNAiMAX(Invitrogen)存在下搅乱的siRNA。siRNA转染24小时后，用25 mMd-葡萄糖(高糖)刺激细胞24小时。单个实验至少重复三次，不同批次或不同制备的细胞。mProx24细胞中基因表达的定量分析。使用如上所述的RNeasy Mini试剂盒(Qiagen)从细胞中制备总RNA。如上所述，采用qRT-PCR检测mProx24细胞中Nox4、MCP-1、TGF-*、OPN mRNA表达水平。 ELISA。肾组织和mProx24细胞中的MT-1/2水平通过 ELISA系统(Frontier Science, Ishikari, Japan)根据制造商的协议进行检测。统计分析。所有值均为平均值 SE。采用单因素方差分析和scheff<s:1>检验对组间差异进行统计学分析。AP值00。0.05认为有统计学意义。结果STZ对MT X/X小鼠的肾损害比MT<s:2>/X小鼠更大。代谢数据汇总于表1。糖尿病小鼠的UAE明显高于非糖尿病小鼠。此外，与糖尿病MT /X小鼠相比，注射STZ后12周，糖尿病MTX/X小鼠的UAE明显增加(120。66 ↑66对92。92 ↑76克/天;P0 0。05).与非糖尿病小鼠相比，糖尿病小鼠糖化血红蛋白和相对肾重增加，体重降低。糖尿病MT与糖尿病MT X/X小鼠的糖化血红蛋白、相对肾重和体重均无显著差异。 STZ在MT X/X小鼠中诱导的间质纤维化较MT mt4/ mt4小鼠更为严重。分离肾脏，并使用PAM染色、马松三色染色和IV型胶原和纤维连接蛋白的免疫荧光进行病理分析(图1A)。经PAM和IV型胶原染色显示，注射STZ后，MT/MT /X/X小鼠肾小球明显肥大，系膜基质明显扩张。然而，PAM和IV型胶原蛋白阳性区域的形态计量学分析显示，MT X/X和MTMT/C之间没有显著差异(图1、B和C)。58↑0.13 vs.2。18↑0.16%;P0 0。05)(图1D)。纤维连接蛋白的免疫荧光染色和Western blotting也显示出相同的趋势(图1、 E和F)。此外，胰岛素治疗可以减轻糖尿病MT X/X小鼠的间质纤维化，表明stz诱导的糖尿病小鼠间质纤维化是由高血糖介导的(图1、G和H)。综上所述，这些结果表明MT缺乏加速了stz诱导的糖尿病间质纤维化。与糖尿病MT/X小鼠相比，糖尿病MT X/X小鼠间质巨噬细胞浸润增加。糖尿病小鼠肾小球和间质中巨噬细胞的数量明显高于非糖尿病小鼠(图2A)。 MT X/X和MT MT /X小鼠对STZ治疗后的肾小球内巨噬细胞浸润没有差异(图2B)。然而，与糖尿病MT相比，糖尿病MTX/X小鼠的间质内巨噬细胞浸润增X小鼠中NF-B的表达增加(图4E)。总的来说，这些数据表明MT缺乏加速了糖尿病诱导的巨噬细胞募集和肾脏炎症基因表达。与糖尿病MT X/X小鼠相比，糖尿病MT X/X小鼠肾脏ROS生成增加。为了评估肾脏的氧化应激，对肾脏切片进行4-HNE免疫染色。这表明，ROS主要在糖尿病MT/X/X小鼠的小管上皮细胞中产生，在非糖尿病MT /X/X小鼠的间质中产生较少(图5A)。此外，我们使用MitoTracker Red cm -h2 XRos和MitoTracker Green FM染色来评估线粒体ROS的产生。与糖尿病MTX/X小鼠相比，糖尿病 MT X/X小鼠的MitoTracker Red cm -h2XRos强度更高(图5B)。这些发现表明，MT缺乏增加了糖尿病诱导的肾间质线粒体ROS。糖尿病MT X/X小鼠线粒体形态恶化。为了证实MT对产生线粒体ROS的有益作用，我们使用电子显微镜更详细地检查了肾脏形态。与非糖尿病MT小鼠相比，糖尿病MT小鼠的肾近端小管细胞肿胀的线粒体数量增加，嵴也明显减少，与糖尿病MT小鼠相比，糖尿病MT X/X小鼠的线粒体数量进一步增加(图6)。这些结果表明，MT缺乏损害了糖尿病肾脏近端小管上皮细胞的线粒体功能。敲除MT可增加培养的近端小管上皮细胞中ROS和炎症基因的表达水平。小鼠mProx24肾近端小管上皮细胞转染MT siRNA或乱序siRNA作为对照，并进行 qRT-PCR和ELISA分析。与对照细胞相比，MT敲低细胞中MT mRNA和蛋白的表达明显受到抑制(图7、A和 B)。MT敲低细胞中高糖诱导的Nox4mRNA表达增加(图7C)。为了评估mProx24细胞中的线粒体ROS，我们使用MitoTracker Red cm- h2 XRos和MitoTrackerGreen FM进行双重染色。转染MT siRNA的mProx24细胞中，MitoTracker Red cm -h2XRos的强度增加(图7G)。同样，MT RNAi上调MCP-1、TGF-输出、 OPN等炎性基因的表达水平(图2)。 F110 金属硫蛋白缺乏会加重糖尿病肾病7,d-f)。这些发现表明，MT的下调会加剧高糖诱导的肾近端小管上皮细胞的氧化应激和炎症。 讨论 在本研究中，我们证明MT缺乏加速了stz诱导的糖尿病小鼠的蛋白尿和间质纤维化，但不影响血糖水平。糖尿病MT X/X小鼠肾间质巨噬细胞浸润增加，炎症基因MCP-1、TGF-;)和OPN表达增加。此外，糖尿病 MT X/X小鼠线粒体ROS增加，线粒体断裂。对近端小管上皮细胞的体外研究表明，MT的下调增加了与氧化应激相关的Nox4的表达和炎症基因的表达。我们的研究结果表明，MT在糖尿病肾脏中具有抗氧化和抗炎作用，并独立于血糖水平阻止糖尿病肾病的发展。MT包括一个低分子量、富含半胱氨酸、普遍存在和可诱导的细胞内蛋白家族，它们与重金属(如锌、铜和镉)结合，并参与金属稳态和解毒(1)。哺乳动物MT家族包括四种亚型:MT-1、MT-2、MT-3和 MT-4。MT-3主要是脑特异性的，在神经元和受刺激的神经胶质细胞中表达(16)，而MT-1/2这两种主要亚型在大多数器官中表达。然而，MT在肾脏中的表达尚不清楚。这项研究和我们最近的研究表明，MT-1/2在糖尿病小鼠(图3)和大鼠(21)的肾近端小管上皮细胞中被高度诱导。这项研究还表明，MT以前曾被报道为一种有效的抗氧化剂;保护细胞免受氧化损伤(2,5,9,17,18)。因此，我们假设MT可能作为一种抗氧化蛋白在肾脏中被诱导，从而保护肾脏免受糖尿病诱导的ROS和炎症的影响。许多研究已经提出氧化应激在糖尿病肾病发病机制中的重要作用(3,11,29)。我们通过评估线粒体ROS的产生来评估肾脏的氧化应激。F111 金属硫蛋白缺乏加剧糖尿病肾病糖尿病MT/小鼠。电镜下还显示，与糖尿病MT X/X小鼠相比，糖尿病 MT X/X小鼠近端小管上皮细胞线粒体肿胀更为严重。据报道，线粒体形态在包括糖尿病肾病在内的肾脏疾病中发生改变(8,31,32)。由于MT是一种有效的抗氧化剂和适应性蛋白，可以保护细胞和组织免受氧化应激(12)，我们推测MT缺乏可能导致糖尿病 MT X/X小鼠线粒体肿胀增加。但MT与线粒体形态的关系尚未见报道，有待进一步研究。我们还进行了siRNA实验，以探索MT对Nox4基因表达水平的影响，作为ROS生成的启动子，以及对培养的近端小管上皮细胞线粒体ROS的影响。敲除MT可增加Nox4的表达和MitoTracker Red cm-h2XRos的强度，这表明MT可能通过减少近端小管上皮细胞的氧化应激来阻止Nox4衍生ROS的产生。总之，这些结果表明MT缺乏会增加糖尿病引起的肾间质氧化应激。炎症也与糖尿病肾病的发展有关(13,15,19)。本研究发现，糖尿病MT X/X小鼠中巨噬细胞标志物CD14、趋化因子 MCP-1、细胞因子TGF->和OPN的表达水平升高。同样，与糖尿病MT /X小鼠相比，糖尿病MT X/X小鼠的间质内巨噬细胞浸润和间质纤维化增加。然而，巨噬细胞在肾小球中的浸润和系膜基质的积累在两种类型的小鼠中相似。此外，体外研究表明，敲除MT可提高培养的近端小管上皮细胞中MCP-1、TGF-输出、 OPN等炎症基因的表达水平。这些结果表明，在糖尿病肾病中，MT缺乏涉及间质炎症，而不是肾小球炎症。与糖尿病MT X/X小鼠相比，炎症基因的主要调节因子NF-B在糖尿病MTX/X小鼠中的表达增加。提示MT可能通过抑制NF-B抑制高糖诱导的炎症。我们和其他人(14,27)已经证明MT在MT敲除小鼠中镉或顺铂诱导的慢性肾损伤模型中起保护作用，但尚未报道MT敲除小鼠糖尿病肾病的实验模型。虽然我们之前已经证明stz诱导的糖尿病大鼠肾脏中MT表达上调(21)，但MT是否能预防糖尿病诱导的氧化应激和炎症，从而预防糖尿病肾病，尚不清楚。足细胞特异性 MT转基因小鼠表明，足细胞中MT的过表达可以改善糖尿病肾病的主要特征(33)，这表明保护足细胞可以抑制糖尿病肾病。通过补充锌诱导肾小管MT合成也可以通过对抗氧化应激来预防糖尿病肾病(23,28)。我们目前和以前的研究(21)表明，MT主要在糖尿病肾脏的肾小管而不是足细胞中被诱导。因此，肾近端小管上皮细胞中的MT可能是治疗糖尿病肾病的治疗靶点。总之，我们证明MT缺乏加速了高糖诱导的肾脏化应激和炎症。本研究结果表明，MT作为抗氧化蛋白在保护肾脏免受糖尿病应激中起重要作用。我们的发现提示MT可能是治疗糖尿病肾病的一个新的治疗靶点。
微医药 2024-03-21阅读量3305